LAB: Día 5

Hoy hemos seleccionado las mejores construcciones para transfectarlas con las células. Las transfectamos con PEI y después le pusimos optiMEM. Las agitamos y añadimos un micro gramo de ADN. Después gorreamos las mezclas y las dejamos reposar 20 minutos. Añadimos la mezcla a los pocillos con las células mediante pipeteo por goteo. Después empleamos las …

LAB: Día 4

Las colonias que sembramos en el medio se han multiplicado, multiplicando así nuestros plásmidos. Utilizamos un kit para extraer y purificar el plásmido de las bacterias. Medimos el rendimiento de la extracción utilizando el nanodrop. Después hicimos una mezcla que dividimos en 7 tubos, y a cada uno le añadimos el ADN de una colonia …

LAB: Día 3

En el día de hoy, introducimos la proteína BK que hemos construido introduciendo la proteína fosforescente en líneas celulares; que para este caso, utilizamos la H3K293T, que son células epiteliales embrionarias de riñón. Para ello, lo primero que hicimos fue aspirar el medio de cultivo de DMEM High Glucose y añadimos 5ml de PBS1x estéril …

LAB: Día 2

Hoy hemos purificado los fragmentos de ADN que habíamos puesto en la nevera con un kit, Macherey Nagel específico para esto, y hemos medido la concentración del ADN utilizando el nanodrop. Después procedimos a hacer unos cálculos para la nueva mezcla de los ADN con otras substancias, añadiendo encimas para que se producirse la ligación …

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