LAB: Día 4

Las colonias que sembramos en el medio se han multiplicado, multiplicando así nuestros plásmidos. Utilizamos un kit para extraer y purificar el plásmido de las bacterias. Medimos el rendimiento de la extracción utilizando el nanodrop. Después hicimos una mezcla que dividimos en 7 tubos, y a cada uno le añadimos el ADN de una colonia de bacterias. Además, dejamos un tubo con solo mezcla como valor negativo.

Introducimos las PCR en el termociclador, y mientras preparamos un gel de agarosa con GelRed. Pusimos 5ul del producto de PCR en el gel para hacer una electroforesis. El plásmido que hemos hecho, ha de ser introducido en las células que hicimos el día anterior para así poder ver la proteína BK baja microscópica de florescencia. Como el flask en el que actualmente tenemos las células no se puede usar para microscópica e florescencia, así que vamos a pasar las células a cubreobjetos (con Poly-L-lysine para que las células se peguen) que colocaremos en placas de 12 pocillos. 

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